Unser 10. Leibniz Plant Biochemistry Symposium am 7. und 8. Mai war ein großer Erfolg. Thematisch ging es in diesem Jahr um neue Methoden und Forschungsansätze der Naturstoffchemie. Die exzellenten Vorträge über Wirkstoffe…
Omanische Heilpflanze im Fokus der Phytochemie IPB-Wissenschaftler und Partner aus Dhofar haben jüngst die omanische Heilpflanze Terminalia dhofarica unter die phytochemische Lupe genommen. Die Pflanze ist reich an…
Geschmack ist vorhersagbar: Mit FlavorMiner. FlavorMiner heißt das Tool, das IPB-Chemiker und Partner aus Kolumbien jüngst entwickelt haben. Das Programm kann, basierend auf maschinellem Lernen (KI), anhand der…
Eschen-Lippold, L.; Bauer, N.; Löhr, J.; Palm-Forster, M. A. T.; Lee, J.;Rapid Mutagenesis-Based Analysis of Phosphorylation Sites in Mitogen-Activated Protein Kinase SubstratesKomis, G. & Šamaj, J., eds.Methods Mol. Biol.1171183-192(2014)ISBN:978-1-4939-0922-3DOI: 10.1007/978-1-4939-0922-3_15
In eukaryotes, mitogen-activated protein kinases (MAPKs) are one of the best studied pathways for posttranslational modification-mediated regulation of protein functions. Here, we describe a rapid in vitro method to screen potential protein phosphorylation sites targeted by MAPKs. The method is based on PCR-mediated mutagenesis together with a type IIs restriction digest. Screening for the successfully mutated clones is further facilitated through introduction of a second diagnostic restriction site. Besides time-saving, this reduces the cost for sequencing confirmation of the positive clones, which are used for subsequent recombinant protein production and kinase assay validation.